總膳食纖維（TDF）的國標(biāo)測(cè)定方法（符合AOAC）

空白實(shí)驗(yàn)應(yīng)該在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中進(jìn)行，*后要從結(jié)果中扣除以去掉試劑等因素對(duì)結(jié)果的影響。將1克樣品，稱重精度到0.1毫克,在400毫升的燒杯中,混合到50毫升PH為6的磷酸緩沖溶液中,加磁力攪拌子,加100微生的熱穩(wěn)定的α-淀粉酶溶液,徹底混合,蓋上鋁箔。放到100度的水浴中，讓樣品溫度保持在95—100度保持15分鐘，控制好溫度，然后從水浴中移出，冷卻到室溫。

用10毫升的0.275N的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)PH到7.5,向GDE中添加冷水將溫度降到60度,加100微升的蛋白酶溶液(50毫克放在1毫升磷酸鹽緩沖液中).燒杯蓋上濾箔連續(xù)攪拌的情況下在60度時(shí)培養(yǎng)30分鐘。冷卻到室溫，用0.325N的鹽酸調(diào)節(jié)PH到4.0—4.6,用PH計(jì)控制PH值。

添加300毫升的淀粉葡(萄)糖苷酶（ 葡萄糖淀粉酶 ）溶液，蓋上鋁箔在連續(xù)攪拌的情況下60度水浴培養(yǎng)30分鐘。拿掉攪拌子，280毫升的95%的乙醇預(yù)熱60度，在室溫下沉降60分鐘。完全干凈的玻璃坩堝，放在525度的馬弗爐烘干1小時(shí)，冷卻到室溫，用水清洗，在空氣中晾干。

添加0.5克的硅藻土,玻璃坩堝在130度的烘箱中恒重一個(gè)小時(shí),精度0.1毫克。同硅藻土一起稱重并放在CSF6 （FIWE6）的過濾器中，利用真空。用漏斗轉(zhuǎn)移酶消解完的沉淀物，濾出液用導(dǎo)管進(jìn)行收集。

用20毫升的78%的乙醇溶液洗滌沉淀物3次，10毫升的95%的乙醇溶液洗滌2次，10毫升的丙酮溶液洗滌2次。如果膠狀的濾膜使的過濾能力下降，保持液體狀態(tài)，用細(xì)微的空氣來吹表面（儀器上操作），整個(gè)清洗過程需要半個(gè)小時(shí)。

在105度的烘箱中（70度的真空箱中）將玻璃坩堝連同沉淀物和硅藻土一起烘干一個(gè)晚上，冷卻到室溫，稱重精度為0.1毫克。沉淀物的重量是*終的重量減掉坩堝的重量和硅藻土的重量（需要的重復(fù)樣）。

其中一個(gè)沉淀物的樣用凱氏方法分析不能消化的蛋白含量（N*6.25）,**個(gè)沉淀物的樣在525度的馬弗爐中烘干5個(gè)小時(shí),在干燥箱中冷卻稱重(精度0.1毫克),灰份的重量是前步的總重量減掉坩堝和硅藻土的重量后剩下的重量。

計(jì)算

%空白中的蛋白百分含量（SB）=空白中的蛋白含量/空白的殘留量*100

%空白中灰分含量（CB）=空白中的灰分量/空白的殘留量*100

空白量=空白中的殘留物*[1-（PB+CB）/100]

%樣品的蛋白含量（SP）=樣品中的蛋白量/樣品殘留物量*100

%樣品灰分含量（SA）=樣品中灰分量/樣品殘留物量*100

%TDF={殘留物量-[（PC+CC）*殘留物量/100]-空白量}/樣品重量*100

簡化為：

%TDF=[殘留量*（100-PC-CC）-空白量]/樣品重量

注：這里的殘留量是指重復(fù)空白或者樣品的所獲得的平均殘留量   這里的樣品量是指兩個(gè)樣品的平均重量。

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