摘要:茶多酚是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等。其中以黃烷醇類物質(zhì)(兒茶素)*為重要。
◆ 摘要
采用VERTEX STI 5000等度和梯度高效液相色譜儀分析茶多酚中的兒茶素和***
◆ 前言
茶葉中兒茶素類化合物是茶葉中含量較豐富的一類功能性活性成分,在新茶中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(以干葉計)為 1 2 %~ 3 2 %。由于具有廣泛的保健和藥理功效以及較強的食品抗氧化特性,茶葉中兒茶素近年來已成為醫(yī)藥和食品研究領(lǐng)域的熱點之一,本文采用上海禾工VERTEX STI 5000分析茶葉及茶多酚中兒茶素,方便,準(zhǔn)確,快速。
◆ 實驗部分
本實驗在VERTEX STIP5000高壓恒流泵、UV5000紫外可見檢測器、Rheodyne 7725i高壓進樣閥、Vertex AQ-C18. 色譜柱上完成
◆ 色譜條件
色譜柱: Vertex AQ-C18 5μm 4.6×200 mm
流動相: 等強度洗脫為CH3OH-H2O-TFA(體積比為25∶75∶0.05)
梯度洗脫的流動相A為甲醇,流動相B為體積分?jǐn)?shù)為0.05%的TFA水溶液,梯度程序為22%A(4 min) 11 min40%A(6 min)4 min22%A。A的體積分?jǐn)?shù)恒定在22%(即處于初始狀態(tài))平衡5 min,以便下一次進樣。
流 速: 1.0mL/min
柱 溫: 35℃
檢測波長: 278 nm或210 nm
樣 品: 西湖龍井,世紀(jì)茶多酚Ⅰ號
標(biāo) 準(zhǔn) 品: EGC,D-C,EC,EGCG和ECG,純度均為98%
進樣量: 20μL
◆ 結(jié)果與討論圖1龍井茶樣在Vertex AQ-C18柱上的色譜分離圖
Fig.1 Chromatogram of Longjing Tea on Vertex AQ-C18column
Mobile phase: methanol-water-trifluoro acetic acid (25∶75∶0.05,V/ V); detection wavelength:278 nm; flow rate:1 mL/min;column temperature:35℃.
Peak identification:1.EGC;2.D-C;3.EGCG;4.EC;5.CAF;6.GCG;7.ECG.
Fig.2 Chromatogram of catechins in Century Green Tea PolyphenolⅠon Vertex AQ-C18column
Mobile phase:A,methanol, B,0.05% trifluoro acetic acid solution; elution procedure: 22% A(4 min)11 min40% A(6 min)4 min22%A;detection wavelength:210 nm
Peak identification:8.CG; others are same as in Fig.1.
◆ 樣品制備
茶 葉樣 準(zhǔn)確稱取1 g左右的干茶葉樣品于250 mL燒杯中,倒入200 mL左右已煮沸的超純水,并把燒杯保溫于95℃左右的熱水浴中,每隔30s攪拌一次,持續(xù)浸提10 min。取出燒杯,適當(dāng)冷卻后用普通定性濾紙過濾,并用少量超純水洗滌燒杯和殘渣2~3次,過濾洗滌液,將濾液全部轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中。待瓶內(nèi)溶液完 全冷至室溫時,用水定容至刻度,搖勻。取此茶浸提液3.00 mL于10mL容量瓶中,用體積比為70∶30∶0.05的CH3OH-H2O-TFA混合液稀釋至刻度,過濾后通過Sep-pakC18小柱,流出液用 0.5μm微孔膜過濾后作HPLC分析。
茶多酚樣 準(zhǔn)確稱取50 mg左右樣品于100 mL容量瓶中,用體積比為1∶1的CH3OH-H2O混合溶液溶解并定容至刻度,通過Sep-pak C18小柱處理后,再用0.5μm微孔膜過濾,濾液供HPLC分析使用。
◆ 結(jié)論
用杭州奧希的VERTEX STI 5000等度高效液相色譜儀分析茶葉及茶多酚中兒茶素,方便,準(zhǔn)確,快速。
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